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干貨:關(guān)于酶活檢測(cè)那些事(一)

酶活性檢測(cè)是我們常做的理化實(shí)驗(yàn),廣泛用于抗逆、生長(zhǎng)發(fā)育、品種選育等研究,涵蓋土壤、植物、動(dòng)物、納米材料等樣品類型。

酶活性檢測(cè)的方法通常有:

  1. 直接比色法。所用儀器為紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀,如SOD檢測(cè)、POD檢測(cè)等。
  2. 酶聯(lián)免疫法(ELISA)。所用儀器為酶標(biāo)儀。如植物蛋白酶檢測(cè)。

上面兩種方法的原理基本一致,即酶與底物作用后,反應(yīng)開(kāi)始進(jìn)行,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后,反應(yīng)液會(huì)出現(xiàn)顏色的變化(生成有顏色的新化合物或反應(yīng)液中有顏色的化合物被分解),反映為吸光度值(OD值)的變化。不同之處在于,酶聯(lián)免疫法為間接測(cè)定,有抗體的加入發(fā)生酶聯(lián)反應(yīng)。

除此之外,還有其他方法。如固氮酶活性檢測(cè),其原理是固氮酶可以將乙炔還原成乙烯,通過(guò)測(cè)定還原后乙烯的量來(lái)反應(yīng)酶活性,所用儀器為氣相色譜儀(帶FID檢測(cè)器)。

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